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列举几个高效液相色谱仪分析时出现故障的原因

发布时间:2021-07-30

        鉴于高效液相色谱在整个行业的广泛应用,每个实验室分析员都应该精通高效液相色谱的应用,能够分析一些常见的故障,从而在运行故障时解决问题,提高工作效率。根据多年经验,总结保留时间漂移、变化快、柱压不稳定的原因,仅供参考!


  关于漂移问题:


  控温不良:解决办法是用恒温装置保持柱温恒定;


  当流动相发生变化时,应防止其蒸发和反应;


  (3)柱平衡不好,柱平衡时间较长。


  关于快速变化


  (1)关于流量的变化,操作员需要重新设置流量以保持其稳定;


  (2)泵内有气泡,可通过排气等操作排出;


  流动相不合适。解决办法是在控制室更换或混合流动相。


  Q2:拖尾或双峰的原因是什么?


  筛板堵塞或色谱柱故障:解决办法是反冲洗色谱柱,更换筛板或更换色谱柱;


  有干扰峰。要解决它,运算符需要使用更长的列;更换选择性好的流动相或色谱柱;


  色谱柱可能过载,从而减少进样量。


  Q3:HPLC灵敏度不足的主要原因及解决方法是什么?


  样本量不足:解决办法是增加样本量;


  样品没有流出色谱柱。流动相或色谱柱可根据样品的化学性质更换;


  样品与检测器不匹配。根据样品的化学性质调整波长或更换检测器;


  探测器衰减过大。调节衰减;


  探测器的时间常数过大。解决办法是减少时间参数;


  检测池窗口污染。解决办法是清洁泳池窗户;


  检测池内有气泡。溶液正在排空;


  记录仪的压力测量范围不合适。只需要调整电压范围;


  流动相流动不合适。只需调节流量;


  参加检测器和记录器超过校准曲线。解决办法是检查记录仪和检测仪,重新制作校准曲线。


  Q4:进行高效液相色谱分析时,柱压不稳定。原因是什么?怎么解决?


  比例阀故障:更换比例阀;


  泵密封损坏:更换密封;


  溶剂中的气泡:解决办法是对溶剂进行脱气,必要时改变脱气方式;


  系统检查泄漏点,查找泄漏点并密封;


  梯度洗脱,压力波动正常时。


  问题5:操作人员更换了另一个ODS柱,但保留时间无法重现。为什么呢?


  这是因为分析物可能具有形成氢键的能力。虽然近年来填料的制造技术有了很大的提高,但不同厂家的ODS填料表面硅烷醇基的浓度是不同的。正是这些硅烷醇基可能与样品相互作用。


  因此,相同分析物成分在不同ODS柱上的相对保留时间可能不同。在流动相中加入少量的竞争对手,如三乙胺(TEA),会使硅烷醇基的键合能力饱和,从而保证在不同等级色谱柱上相对保留时间的良好重现性。如果分离条件好,系统稳定,满足系统适用性要求,无需重复保留时间。

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