如何计算高效液相色谱仪分辨率

     

        科学家使用高效液相色谱仪分离化合物混合物，通常该方法包括将样品注入色谱柱，并与一种或多种溶剂混合。不同化合物对柱子的吸附或粘连程度不同的溶剂推动化合物通过柱子时，混合物中的一个成分首先离开柱子。仪器在化合物离开光谱柱时进行检测，生成光谱图，该光谱图由一个图构成，x轴为了保留时间，yt轴为检测器的信号强度。化合物离开柱子时，在柱子图中产生峰。一般来说，色谱图中的峰值距离越远越窄，分辨率越高。科学家认为分辨率为1。


     通过记录每个峰底部的 x 轴值，测量色谱图中两个相邻峰的宽度。x 轴代表保留时间，通常以秒为单位。因此，如果峰值从 15.1 秒开始并在 18.5 秒结束，则其宽度为 (18.5 - 15.1) = 3.4 秒。


    通过记录时间，即 x 轴上的位置来确定保留时间，该位置对应于峰值的位置。该值通常位于用于计算步骤 1 中宽度的两个值之间。例如，步骤 1 中给出的示例将在大约 16.8 秒处显示最大值。


    通过以下方式计算两个峰之间的分辨率 R：


 
    其中 RT 1和 RT 2代表峰 1 和 2 的保留时间，W 1和 W 2代表在其基部获得的峰的宽度。继续步骤 2 和 3 的示例，一个峰的保留时间为 16.8 秒，宽度为 3.4 秒。如果第二个峰的保留时间为 21.4 秒，宽度为 3.6 秒，则分辨率为：