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高效液相色谱仪有哪些类型?

发布时间:2021-07-20

                 

        高效液相色谱是一种广泛使用的分析技术,许多行业和研究领域都非常依赖它。在本文中,您将了解高效液相色谱仪系统的工作原理以及常用的不同类型的高效液相色谱仪机器。其目的是为您提供高效液相色谱仪系统的类型及概述。


高效液相色谱仪 是如何工作的?

高效液相色谱仪 用于定量、鉴定和分离非挥发性液体混合物的成分(挥发性化合物通过气相色谱法分离)。溶剂从溶剂容器中泵出并与液体样品混合。溶剂样品混合物通过高效液相色谱仪柱并进入检测器,在那里以色谱图的形式给出电子输出。废物收集在机器外部的容器中。


高效液相色谱仪 柱是系统的分离组件。高效液相色谱仪 色谱柱包含具有各种孔径的“填充材料”,称为“固定相”。通过孔隙的液体样品被称为“流动相”。当流动相通过固定相时,较大的分子会被较小的孔捕获,从而使较小的分子能够更快地洗脱 - 这就是分离和分离过程。这会导致较小的分子具有更快的保留时间,而较大的分子具有较慢的保留时间。保留(洗脱)时间是分子到达检测器所需的时间。保留时间是根据已知标准测量的,因此可以识别样品中的分子。分子在柱子中停留的时间越长,色谱图上的峰越宽(和越不尖锐)。流动相的内部压力也可以达到 400 个大气压。


高效液相色谱仪有哪些类型?

高效液相色谱仪 主要有 3 类:正相 高效液相色谱仪、反相高效液相色谱仪和超高效液相色谱仪(超高效液相色谱仪)。

尽管有名称,正相高效液相色谱仪并不是最常用的高效液相色谱仪方法。正相高效液相色谱仪使用非极性溶剂作为流动相,硅胶颗粒作为固定相。在常规高效液相色谱仪中,与非极性化合物相比,极性化合物在固定相中会更长时间地粘附在极性有机硅上。因此,非极性化合物在正常高效液相色谱仪中的洗脱速度更快。孔径一般在3微米左右。

反相高效液相色谱仪是最常见的高效液相色谱仪类型。在反相高效液相色谱仪中,固定相被烃链(通常长 8-18 个碳)改性,导致色谱柱变为非极性。也使用极性溶剂。在反相高效液相色谱仪中,样品中的极性分子会与溶剂产生强烈的吸引力,从而使它们更快地洗脱。它们也不会与非极性固定相相互作用。非极性化合物会与固定相产生范德华力和分散相互作用,因此它们的洗脱速度较慢。

与高效液相色谱仪相比,超高效液相色谱仪 运行速度更快、使用的溶剂更少且分辨率更高。色谱柱也更小,固定相颗粒的尺寸要小得多。较小的孔(亚 2 微米)促进了分子更好的分离和分辨率。较短的色谱柱还可以进行快速检测。然而,超高效液相色谱仪 不能用于干燥或未过滤的样品,因为较小的孔会堵塞,这是一个昂贵且耗时的修复过程。

填料材料的新进展已经开始在高效液相色谱仪和 超高效液相色谱仪 之间创建中间解决方案。核壳颗粒是目前市场上的一种此类填充材料。使用核壳颗粒的效率与使用亚 2 微米颗粒的效率相同,但可以在低得多的压力下运行。甚至有人猜测这些效率可以在标准高效液相色谱仪机器上产生。

高效液相色谱仪 机器通常包含一个紫外线检测器来测量样品中分子发出的紫外线。但是,某些高效液相色谱仪机器可以与质谱仪 (MS) 结合使用。使用 高效液相色谱仪-MS 机器时,可以通过 m/z 比来识别分子,而无需知道保留时间。

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